StarRed 是一种高灵敏、高稳定性、安全的荧光核酸凝胶染色试剂。它独特的油性大分子结构,使其不能穿透细胞膜进入细胞内,也不易挥发升华,被人体吸入。
StarRed与溴化乙锭(EtBr,EB)具有相同的光谱特性,其独特的分子结构可与 DNA 静电结合,不会影响 DNA 条带的迁移,因此可以替代EB等不安全的核酸染
料,且不需要脱色。适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的 dsDNA,ssDNA 以及 RNA 染色,可以选择胶染法或泡染法进行染色,使用非常方便、灵活。
注意事项:
组分名称 | FS-E1002-S | FS-E1002-S | 保存条件 |
StarRed Nucleic Acid Gel Stain |
20μL | 500μL | 室温,避光 |
TAE 缓冲液配置:
50X TAE 电泳缓冲液[Tris 242g (2M),EDTA 37.2g (100mM),加醋酸约 57ml 调节 pH=8.5;定容 1000mL;
⽤ ddH2O 稀释 50 倍配制 1X TAE 电泳缓冲液。
TBE 缓冲液配置:
10X TBE 电泳缓冲液[Tris 107.8146g (890mM),硼酸 55.0287g(890mM),EDTA 5.845g(20mM),加 NaOH 约 4g 调节 pH=8.3;定容 1000mL];
⽤ ddH2O 稀释 10 倍配制 1X TBE 电泳缓冲液。
1. 胶染法(同 EB,电泳前染色)
1)配制合适浓度的琼脂糖凝胶,微波炉加热至完全熔化。
2)加入 GelRed 核酸染料,使用终浓度为 1×(即每 50 mL 琼脂糖溶液中加入 5 μL StarRed 10,000×水溶液)。
3)将含有 Star Red 核酸染料的琼脂糖溶液倒入制胶器并插好梳子,室温下凝固约 30-60 min。
4)按照常规方法上样并电泳。
5)紫外拍照观察。
✮注:Star Red 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,也可以将 Star Red 储液加到含有琼脂糖粉末的电泳缓冲液中,
然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。Star Red 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
2. 泡染法(电泳后染色)
1)配制合适浓度的琼脂糖凝胶,微波炉加热至完全熔化。
2)将琼脂糖溶液倒入制胶器并插好梳子,室温下凝固约 30-60 min。
3)按照常规方法上样并电泳。
4)用 0.1 M NaCl 溶液稀释 StarRed 10,000×水溶液至 3×染色液(即将 15 μL StarRed 10,000×水溶液加入到 50 mL 0.1 M NaCl 溶液中,该染液可重复使用 3 次左右,室温避光保存)。
5)将凝胶放入合适的容器中,加入 3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色 30 min 左右。最佳染色时间与凝胶厚度及浓度有关。 对于含 3.5-10%聚丙烯酰胺的凝胶,
染色时间通常介于 30 min 到 1 h,并随聚丙烯酰胺含量增加而延长。
6)紫外拍照观察